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目的探讨I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)mRNA和蛋白在人卵泡壁颗粒细胞(GCs)和卵丘颗粒细胞(CCs)中的表达水平及变化.方法 收集2014年3月至2016年6月期间在华中科技大学同济医学院生殖医学中心接受ICSI治疗的患者卵泡液,其中大卵泡(直径≥18 mm)和小卵泡(≤10 mm)各86份,离心后上清用于Western Blot和ELISA实验,沉淀用密度梯度离心法分离纯化得到GCs;收集脱颗粒细胞的培养液直接离心法获得CCs.GCs和CCs均分别提取mRNA和蛋白,荧光定量PCR检测GCs和CCs中ADAM TS-1 mRNA水平,Western Blot检测ADAMTS-1蛋白水平,比较ADAMTS-1 mRNA和蛋白在不同颗粒细胞中的表达差异.结果 ADAM TS-1 mRNA在大卵泡GCs、小卵泡GCs、CCs中均有表达,且其在小卵泡GCs中表达量最高,显著高于CCs(P<0.05).ADAMTS-1蛋白在大卵泡GCs、小卵泡GCs、CCs及卵泡液中均有表达,且存在成熟ADAM TS-1蛋白(85 Kda)及前体(110 Kda)两种形式;其在CCs中的表达量最高,显著高于大、小卵泡的GCs(P<0.05),在小卵泡液中的含量显著高于大卵泡液(P<0.01).结论 ADAMTS-1 mRNA在人卵泡GCs和CCs中均有表达,ADAMTS-1蛋白在人卵泡GCs、CCs和卵泡液中均存在前体和成熟形式,且以成熟形式为主.ADAM TS-1在人卵泡GCs、CCs和卵泡液中的表达特点

作者:陈梅;张玲

来源:生殖医学杂志 2020 年 29卷 6期

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作者:
陈梅;张玲
来源:
生殖医学杂志 2020 年 29卷 6期
标签:
ADAMTS-1 人卵泡液 壁颗粒细胞 卵丘细胞
目的探讨I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)mRNA和蛋白在人卵泡壁颗粒细胞(GCs)和卵丘颗粒细胞(CCs)中的表达水平及变化.方法 收集2014年3月至2016年6月期间在华中科技大学同济医学院生殖医学中心接受ICSI治疗的患者卵泡液,其中大卵泡(直径≥18 mm)和小卵泡(≤10 mm)各86份,离心后上清用于Western Blot和ELISA实验,沉淀用密度梯度离心法分离纯化得到GCs;收集脱颗粒细胞的培养液直接离心法获得CCs.GCs和CCs均分别提取mRNA和蛋白,荧光定量PCR检测GCs和CCs中ADAM TS-1 mRNA水平,Western Blot检测ADAMTS-1蛋白水平,比较ADAMTS-1 mRNA和蛋白在不同颗粒细胞中的表达差异.结果 ADAM TS-1 mRNA在大卵泡GCs、小卵泡GCs、CCs中均有表达,且其在小卵泡GCs中表达量最高,显著高于CCs(P<0.05).ADAMTS-1蛋白在大卵泡GCs、小卵泡GCs、CCs及卵泡液中均有表达,且存在成熟ADAM TS-1蛋白(85 Kda)及前体(110 Kda)两种形式;其在CCs中的表达量最高,显著高于大、小卵泡的GCs(P<0.05),在小卵泡液中的含量显著高于大卵泡液(P<0.01).结论 ADAMTS-1 mRNA在人卵泡GCs和CCs中均有表达,ADAMTS-1蛋白在人卵泡GCs、CCs和卵泡液中均存在前体和成熟形式,且以成熟形式为主.ADAM TS-1在人卵泡GCs、CCs和卵泡液中的表达特点