目的：为深入研究鼠伤寒沙门菌毒力基因 spvB的功能，制备鼠伤寒沙门菌 spvB基因完全缺陷变异株，观察spvB基因缺陷株在体外酸性环境中的生存能力。方法根据鼠伤寒沙门菌spvB基因序列，设计PCR特异性引物，制备spvB基因缺陷性同源性核苷酸片段，导入自杀质粒 pCVD442后再导入鼠伤寒沙门菌野生株，进行同源重组，用 PCR方法观察重组现象，将完全重组的菌株作为 spvB基因的缺陷变异株，并通过核苷酸序列分析加以确定。绘制生长曲线，对比 spvB基因缺陷变异株与野生株在酸性条件下的生存情况。结果 PCR 及序列分析证实，缺陷变异株的 spvB基因缺失1749 bp。酸性条件下培养1 h及2 h后，野生株的活菌数高于spvB基因缺陷株，差异有统计学意义(P<0.05)；且野生株在酸性环境中的生存率明显高于缺陷株，野生株在1 h 及2 h 后的生存率分别为85.6
作者：吴春雪；陈强；李红；余晓君；朱春晖；李岚；何美娟；刘晓艳
来源：华中科技大学学报（医学版） 2014 年 4期
