目的:探讨抗HBsAg单链抗体与白细胞介素2融合蛋白在巴氏毕赤酵母(P.Pastoris)中的表达以及初步的纯化、活性鉴定方法.方法:用PCR将目的蛋白基因从质粒PGEM7Zf(+)-HBScFv-IL-2上扩增出来,再亚克隆到酵母表达载体pPICZaA中,转化P.Pastoris宿主菌GS115,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定转化子,重组酵母经甲醇诱导后,通过SDS-PAGE及Western-blot分析鉴定表达产物;再通过亲和层析法纯化目的蛋白;用间接ELISA实验鉴定其活性.结果:表达的重组蛋白分子质量约为44ku,表达量可达12
作者：陈文吟；粟宽源；饶桂荣；余宙耀
来源：天津医药 2004 年 32卷 12期
