目的:构建色素上皮衍生因子(PEDF)基因腺病毒表达载体,为老年性黄斑变性基因治疗奠定基础.方法:从大鼠视网膜组织中提取总RNA,RT-PCR扩增PEDF基因cDNA,并将回收的PEDF基因克隆入质粒pGEM-Teasy载体中,亚克隆入腺病毒表达载体质粒pDC316中,并以DNA序列分析加以证实.结果:基因测序结果表明,所克隆的PEDF基因包含了大鼠PEDF基因阅读框内的全部序列,与NCBI Sequence Viewer中公布的大鼠PEDFmRNA序列(NM-177927)完全一致.结论:PEDF基因腺病毒表达载体的成功构建,为下一步体外包装成病毒颗粒研究基因治疗脉络膜新生血管奠定了基础.
作者:于燕萍;崔靖;王颖;颜华
来源:天津医药 2007 年 35卷 5期