目的构建重组人前脑啡肽原基因(hPPE)腺相关病毒载体(AAV).方法构建质粒骨架上含有新霉素抗性基因表达盒的重组腺相关病毒(rAAV)载体质粒pSNAV-hPPE并酶切鉴定,转染金黄地鼠胚胎肾细胞(BHK 21),后用G418筛选培养形成稳定携带rAAV载体的混合细胞株BHK/SH1;再用HSV1-rc/△UL2感染、包装此细胞株并收获病毒载体rAAV-hPPE,并行DNA探针点杂交测定病毒滴度.结果酶切鉴定pSNAV-hPPE重组成功,病毒滴度为2.5×1012v.g./ml.结论获得的rAAV-hPPE滴度高,感染性好,可以用于转基因镇痛的实验研究.
作者：杨辉；田玉科；王鹏；安珂；高峰；吴小兵；梅伟
来源：中华麻醉学杂志 2005 年 25卷 1期
