目的:构建血管内皮生长因子-葡萄球菌肠毒素A(VEGF-SEA)基因的原核表达质粒,获得VEGF-SEA融合蛋白.方法:制备VEGF-SEA基因片段,插入pET40b构建重组质粒pET40b-VEGF-SEA,经序列分析正确后转化大肠杆菌B121(DE3),进行IVTG诱导表达蛋白.用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达蛋白的相对分子质量及表达形式,并对产物采用His?Bind Buffer kit试剂盒纯化.结果:获得VEGF-SEA基因片段长1 130 bp,经序列分析与预期完全一致,其表达出目的蛋白的大小约为66.2 ku,以包涵体形式表达,经纯化,纯度达到90
作者：边小鹤；孙嘉琳；朱宏丽；罗金凤；胡坤
来源：天津医药 2008 年 36卷 10期
