目的：通过谷胱甘肽巯基转移酶（GST）-促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）原核表达条件的优化及纯化，获得可溶性好、纯度高的重组GST-CRH蛋白。方法通过对GST-CRH转化菌表达温度、菌液密度（OD600）、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）浓度以及诱导时间的摸索，十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）检测可溶性GST-CRH蛋白的表达情况，GST琼脂糖凝胶进行GST-CRH的纯化，Western Blot对表达的目的蛋白进一步鉴定。结果起始OD6000.8、IPTG工作浓度0.1 mmol/L、30℃诱导8 h为GST-CRH最优诱导条件；融合蛋白经Western Blot鉴定为表达的GST-CRH，纯化后纯度＞95
作者：郁硕；陈锋；刘英富；霍景瑞；李光宗；张益；丁辉；樊毫军
来源：天津医药 2017 年 45卷 2期
