目的 构建人Hexastatin蛋白原核表达载体,大量表达并纯化Hexastatin蛋白,为其在体内外的活性研究奠定基础.方法 提取人食管癌EC9706细胞总RNA,通过RT-PCR方法扩增人Hexastatin基因,导入pMD18-T载体测序,然后克隆至pMAL-c4x表达载体,IPTG诱导表达,并利用Amylose亲和树脂纯化融合蛋白,产物进行Western blot 鉴定.结果 经PCR扩增成功获得了687 bp的人Hexastatin基因,测序正确.重组人Hexastatin基因在BL21菌体中获得高效可溶性表达,表达的可溶性蛋白占总蛋白量的24.8
作者:温镭;宋娜玲;贺欣;王德芝;赵启仁
来源:中国生化药物杂志 2010 年 31卷 2期