目的：为了在大肠埃希菌中表达具有生物学活性的小鼠IL－33成熟蛋白。方法利用PCR技术从pcDNA3．1－IL－33质粒中扩增小鼠IL－33成熟蛋白的基因，将其插入原核表达载体pET21a（＋），构建成pET21a－mIL－33质粒，转化至大肠埃希菌BL21，筛选出可表达mIL－33的大肠埃希菌工程菌株。经IPTG诱导表达，用镍柱亲和层析法纯化。结果经SDS－PAGE分析获得纯度高达95％的mIL－33蛋白，相对分子质量18000。 ELISA试验显示mIL－33可以有效的促进肠系膜淋巴细胞产生Th2型细胞因子（ IL－5），与未处理组的差异具有显著的统计学意义。结论利用大肠埃希菌表达系统表达了具有生物活性的mIL－33蛋白，为继续开展IL－33在炎症性肠病的免疫治疗研究奠定了基础。
作者：朱俊丰；桑力轩；杨芳丽；李岩；翟景波；高植鹏；邓芳博；孙逊；王大南；吕昌龙
来源：微生物学免疫学进展 2015 年 5期
