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目的 探讨miR-149对结直肠癌(CRC)细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响及其作用机制.方法 实时荧光定量PCR(q-PCR)方法检测miR-149在CRC细胞SW620、LS174T和人结肠上皮细胞FHC中的表达水平;荧光素酶分析法验证STAT3与miR-149之间的靶向结合关系;q-PCR和Western blot检测miR-149过表达对CRC细胞中STAT3、p-STAT3 mRNA和蛋白表达的影响.将miR-149 mimics与STAT3过表达质粒单独或者共转染至CRC细胞中,并分为miR-NC组、miR-149 mimics组、miR-149 mimics+pEGFP/STAT3组.采用CCK-8法、Transwell法、细胞划痕法、流式细胞术分别检测各分组CRC细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡情况.结果 与正常结肠上皮细胞FHC相比,CRC细胞SW620、LS174T中miR-149表达水平受到抑制(P<0.01).荧光素酶实验证实,在CRC细胞中STAT3是miR-149的一个直接靶基因.过量表达miR-149抑制STAT3、p-STAT3 mRNA和蛋白的表达,降低CRC细胞增殖能力、侵袭能力以及迁移能力(P<0.01).同时,过量表达miR-149也可促进CRC细胞的凋亡(P<0.01).但过表达STAT3可解除miR-149对CRC细胞增殖、侵袭以及迁移能力的抑制作用.结论 miR-149通过靶向STAT3抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭与迁移,同时促进细胞的凋亡.

作者:刘晓柱;李银凤

来源:天津医药 2020 年 48卷 1期

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作者:
刘晓柱;李银凤
来源:
天津医药 2020 年 48卷 1期
标签:
结直肠肿瘤 微RNAs STAT3转录因子 细胞增殖 细胞运动 细胞凋亡 miR-149
目的 探讨miR-149对结直肠癌(CRC)细胞增殖、侵袭、迁移及凋亡的影响及其作用机制.方法 实时荧光定量PCR(q-PCR)方法检测miR-149在CRC细胞SW620、LS174T和人结肠上皮细胞FHC中的表达水平;荧光素酶分析法验证STAT3与miR-149之间的靶向结合关系;q-PCR和Western blot检测miR-149过表达对CRC细胞中STAT3、p-STAT3 mRNA和蛋白表达的影响.将miR-149 mimics与STAT3过表达质粒单独或者共转染至CRC细胞中,并分为miR-NC组、miR-149 mimics组、miR-149 mimics+pEGFP/STAT3组.采用CCK-8法、Transwell法、细胞划痕法、流式细胞术分别检测各分组CRC细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡情况.结果 与正常结肠上皮细胞FHC相比,CRC细胞SW620、LS174T中miR-149表达水平受到抑制(P<0.01).荧光素酶实验证实,在CRC细胞中STAT3是miR-149的一个直接靶基因.过量表达miR-149抑制STAT3、p-STAT3 mRNA和蛋白的表达,降低CRC细胞增殖能力、侵袭能力以及迁移能力(P<0.01).同时,过量表达miR-149也可促进CRC细胞的凋亡(P<0.01).但过表达STAT3可解除miR-149对CRC细胞增殖、侵袭以及迁移能力的抑制作用.结论 miR-149通过靶向STAT3抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭与迁移,同时促进细胞的凋亡.