目的:通过调控心脏干细胞(CSCs)中的miRNA-146b的表达水平,探讨miRNA-146b对CSCs迁移、增殖和分化的影响.方法:取1～3d的C57BL/6小鼠的CSCs,经过磁珠分选,选取c-kit+ CSCs培养.c-kit+CSCs在骨髓间充质干细胞培养液刺激下,后以实时聚合酶链式反应(RealtimePCR)检测c-kit+ CSCs的miRNA146b表达水平.进一步将c-kit+ CSCs培养3d后分为5组进行转染:空白对照组、上调miRNA-146b组、上调阴性对照组、下调miRNA-146b组、下调阴性对照组.以CCK-8法检测转染后c-kit+ CSCs增殖,transwell法检测转染后c-kit+CSCs迁移.PCR法检测GATA-4、MEF2c、TNI、β-MHC等分化相关基因表达水平.结果:在骨髓间充质干细胞培养液刺激下c-kit+CSCs的miRNA-146b表达上调(P＜0.05).在miRNA-146b的前体或抑制剂转染后,能有效使c-kit+ CSCs细胞内miRNA-146b过表达或抑制,与上调阴性对照组比较,上调miRNA-146b组的miRNA-146b表达明显升高[(2.26±1.57)比(340.54±36.63)],与下调阴性对照组比较,下调miRNA-146b组miRNA-146b表达明显下降[(1.11±0.16)比(0.66±0.04)],P均＜0.01.同阴性对照组比较,上调miRNA-146b组c-kit+CSC迁移能力明显降低[(70.6±9.1)比(47±5.3)],下调miRNA-146b组的c-kit+ CSCs迁移能力明显增强[(39.5±4.1)比(48.0±8.8)

作者：宋东强；范虞琪；许左隽；殷兆芳；王长谦

来源：心血管康复医学杂志 2013 年 22卷 2期