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目的 研究内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)在顺铂诱导离体培养小鼠耳蜗毛细胞凋亡中的作用.方法 选取出生后3d的健康昆明小鼠380只(760耳),分离出耳蜗基底膜760条,体外培养24 h后,随机分为对照组和4、8、16 μg/ml顺铂组,每组190条,对照组加入2 ml新鲜培养基,顺铂组分别加入2 ml含不同浓度顺铂(4、8、16 μg/ml)的新鲜培养基,再继续培养24 h后,应用Hoechst 33258荧光染色观察耳蜗毛细胞凋亡情况,并应用Western blot检测ERS标志物葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和内质网凋亡途径标志物半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(cysteinyl aspartate specific proteinase 12,caspase-12)在耳蜗毛细胞中的表达.结果 4、8、16 μg/ml顺铂组耳蜗毛细胞凋亡率分别为10.53%±0.50%、27.12%±2.64%和60.01%±2.75%,均高于对照组(3.67%±0.76%),呈现明显的量效关系;不同浓度顺铂组耳蜗GRP 78和caspase-12的蛋白表达水平亦较对照组明显增高(P<0.01),并随顺铂浓度增大而显著增强(P<0.01).结论 顺铂可诱发小鼠耳蜗毛细胞ERS,ERS可能在其诱导的小鼠耳蜗毛细胞凋亡中发挥了作用.

作者:张晓;周明生;于利;王爱梅

来源:听力学及言语疾病杂志 2016 年 24卷 1期

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作者:
张晓;周明生;于利;王爱梅
来源:
听力学及言语疾病杂志 2016 年 24卷 1期
标签:
内质网应激 顺铂 耳蜗 凋亡 小鼠 Endoplasmic reticulum stress Cisplatin Cochlea Apoptosis Mouse
目的 研究内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)在顺铂诱导离体培养小鼠耳蜗毛细胞凋亡中的作用.方法 选取出生后3d的健康昆明小鼠380只(760耳),分离出耳蜗基底膜760条,体外培养24 h后,随机分为对照组和4、8、16 μg/ml顺铂组,每组190条,对照组加入2 ml新鲜培养基,顺铂组分别加入2 ml含不同浓度顺铂(4、8、16 μg/ml)的新鲜培养基,再继续培养24 h后,应用Hoechst 33258荧光染色观察耳蜗毛细胞凋亡情况,并应用Western blot检测ERS标志物葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和内质网凋亡途径标志物半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(cysteinyl aspartate specific proteinase 12,caspase-12)在耳蜗毛细胞中的表达.结果 4、8、16 μg/ml顺铂组耳蜗毛细胞凋亡率分别为10.53%±0.50%、27.12%±2.64%和60.01%±2.75%,均高于对照组(3.67%±0.76%),呈现明显的量效关系;不同浓度顺铂组耳蜗GRP 78和caspase-12的蛋白表达水平亦较对照组明显增高(P<0.01),并随顺铂浓度增大而显著增强(P<0.01).结论 顺铂可诱发小鼠耳蜗毛细胞ERS,ERS可能在其诱导的小鼠耳蜗毛细胞凋亡中发挥了作用.