目的:检测内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)标志蛋白 GRP78在高糖刺激的条件永生型小鼠足细胞中的表达及其特有Caspase-12凋亡途径与该细胞凋亡之间的关系,探讨高糖是否通过 ERS特有 Caspase-12凋亡途径诱导了小鼠足细胞凋亡。方法体外培养的小鼠足细胞(mouse podocyte,PC),分为正常糖对照组(NG,1 g/l D-glucose)、甘露醇对照组(M,1 g/L D-glucose plus 24.4 mmol/l mannitol)、高糖组(HG,4.5 g/l D-glucose)。分别经细胞同步化、分组干预及刺激12、24、48、72 h后收集细胞,应用TUNEL法及流式细胞术检测细胞凋亡;免疫细胞化学、Western blot 检测 GRP78、Caspase-12蛋白的动态表达。结果与正常糖对照组及甘露醇对照组相比,高糖组小鼠足细胞于48 h及72 h凋亡率明显增高(all P<0.01);ERS标志蛋白 GRP78从12 h表达开始增高,提示永生型小鼠足细胞在高糖刺激下激活了 ERS,ERS特有凋亡途径 caspase-12随时间的延长表达逐渐增高;相关性分析显示 Caspase-12蛋白表达与足细胞凋亡率呈正相关(r=0.915,P<0.01)。结论高糖刺激可以引起足细胞凋亡,ERS在高糖对足细胞的损害过程中被诱导,其特有 Caspase-12凋亡途径参与了足细胞的凋亡,可能在糖尿病(diabetes mellitus,DM)肾组织损害病理过程中发挥重
作者:曹延萍;潘凤军;曹志刚;韩志华;李亚林;刘杰;段惠军
来源:中国组织化学与细胞化学杂志 2014 年 3期