人白血病抑制因子基因在巴斯德毕赤酵母中的表达-临床诊疗知识库

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作者：

王全忠；杨林；欧阳菁；龙綮新；王珣章

来源：

微生物学报 2001 年 41卷 5期

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人白血病抑制因子巴斯德毕赤酵母基因表达生物活性测定

将575bp的人白血病抑制因子基因克隆到表达载体pPICZaA上,构建成重组质粒pPICZaA-hLIF.pPICZaA-hLIF经SacI酶切使之线性化后转化到巴斯德毕赤酵母细胞X-33中.转化子经Mut表型筛选和PCR分析鉴定后,利用甘油增菌和甲醇诱导,实现了hLIF基因在毕赤酵母系统中的表达.SDS-PAGE检测和Western blot分析结果表明表达产物的分子量约为58.5kD,与天然hLIF大小相近,并且具有免疫原性.凝胶薄层扫描分析显示,重组hLIF约占上清总蛋白的32.8

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