目的利用酵母表达技术制备重组人A20蛋白(rhA20),为进一步研究其在脓毒血症中的治疗作用奠定基础.方法利用基因工程技术构建rhA20毕赤酵母表达载体yevCFP-hA20,电转化巴斯德毕赤酵母菌株GS115,筛选高拷贝阳性菌株,甲醇诱导表达rhA20.产物用SDS-PAGE和Western Blot鉴定.同时对诱导表达培养基的pH值和配方,以及培养环境温度等条件进行了优化研究.结果表达产物分子量约93×103,表达条件的优化研究提示:降低诱导培养基pH值、添加低剂量EDTA、蛋白酶水解物和降低培养温度,可以使全长表达产物提高¨倍,占总蛋白的18.24
作者:吴丽娟;蒋建新;朱佩芳;康格非
来源:第三军医大学学报 2006 年 28卷 3期