目的 比较两种不同活化方法制备的酪胺化Hib荚膜多糖(PRP-Ty)的特性,分别作为包被抗原建立测定人血清中Hib荚膜多糖特异抗体含量的ELISA方法.比较并确定包被抗原,对建立的ELISA方法进行初步验证.方法 分别用CNBr和CDAP作为活化剂制备PRP-Ty,经Sepharose CL-4B层析分析相对分子质量分布范围,并确定适宜PRP-Ty抗原包被浓度的间接ELISA方法,以人Hib荚膜多糖IgG抗体定量标准品作为阳性标准,通过四参数非线性拟合计算人血清Hib荚膜多糖IgG抗体含量.结果 CNBr活化法制备的酪胺化Hib荚膜多糖(PRP-TyCNBr)较天然Hib荚膜多糖相对分子质量向小相对分子质量方向偏移,而CDAP活化法制备的酪胺化Hib荚膜多糖( PRP-TyCDAP)较天然Hib荚膜多糖相对分子质量分布无显著变化；两种PRP-Ty在0.65～2.00 μg/mL的包被浓度范围内均有良好的包被活性,方法的灵敏度均达到0.02 μg/mL IgG抗体检测水平.结论 PRP-TyCDAP作为包被物的ELISA测定方法可以更加真实可靠地反映人血清IgG抗体水平.
作者：侯亚莉；袁菲；周晖国；任静；胡浩；刘方蕾；吴兵；谢贵林；赵志强
来源：微生物学免疫学进展 2012 年 40卷 3期
