[背景]幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H. pylori)是胃癌的主要致病因素,其分泌的细胞毒素相关基因A蛋白(Cytotoxin associated gene A,CagA)是目前已知唯一能被H. pylori注入胃上皮细胞并模拟细胞内蛋白发挥作用的癌蛋白,参与胃癌的发生发展.[目的]比较H. pylori东亚株和西方株CagA结构差异,初步探讨H.pylori-CagA对胃癌细胞增殖与凋亡的影响.[方法]对H. pylori东亚株和西方株CagA的核酸及氨基酸序列进行生物信息学分析,构建含东亚株和西方株cagA基因的真核表达载体,转染胃癌细胞AGS,用Western blot法检测CagA蛋白的表达,用CCK8法测定细胞的生长曲线,流式细胞术检测细胞凋亡.[结果]生物信息学分析发现H.pylori东亚、西方菌株CagA的核酸序列和氨基酸序列均存在特征性差异.构建了含东亚、西方菌株cagA基因的表达载体[命名为GZ7/cagA(东亚株)和26695/cagA (西方株)].与空载体组比较,GZ7/cagA和26695/cαgA转染组均表达CagA蛋白,两组比较表达量无显著性差异,GZ7/cagA转染组细胞生长显著增加,而26695/cagA转染组细胞生长显著降低(P<0.05).GZ7/cagA转染组、26695/cagA转染组细胞的凋亡率分别为7.23士0.96及9.17±1.40,均高于空载体组(5.03±0.63),差异有统计学意义(P<0.05).[结论]东亚株与西方株CagA之间有
作者:龙妮娅;熊林;赵艳;袁航;李雅洁;陈学书;张晓怡;谢渊;周建奖
来源:微生物学通报 2018 年 45卷 4期