本文旨在建立一种以agr基因为靶点，快速检测金黄色葡萄球菌的环介导等温扩增（ LAMP）方法。首先，针对金黄色葡萄球菌附属基因调控基因agr序列，设计了4条特异性引物；优化了LAMP体系中甜菜碱、dNTP浓度、长短引物比等因素；通过对14株不同金黄色葡萄球菌菌株和4株其他常见食品致病菌株进行检测，评估引物特异性。结果表明，在Mg2＋浓度为2．4 mmol／L，dNTP浓度为0．8 mmol／L，甜菜碱浓度为0．1 mol／L，长短引物比为1：8，65℃反应50 min条件下扩增可达最佳效果。优化后的LAMP对14株金黄色葡萄球菌均表现为阳性，对4株非金黄色葡萄球菌菌株表现为阴性，证明引物具有特异性。本文首次利用agr基因作为靶基因片段，建立了一个简单、快速、特异性强的检测金黄色葡萄球菌的方法，在食品安全检测方面极具意义。
作者：廖颖玲；耿宁；金晓璐；权春善；金黎明；胡文忠
来源：微生物学杂志 2015 年 4期
