目的 基于SYBR Green Ⅰ染料建立沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌的多重荧光定量PCR检测方法.方法 针对沙门菌invA基因、志贺菌ipaH基因和virA基因、金黄色葡萄球菌nuc基因和femA基因片段设计引物,根据Tm值的差异分析确定荧光定量PCR扩增的靶基因和特异性引物,通过优化PCR反应体系,建立了用SYBR Green Ⅰ多重荧光定量PCR熔解曲线来检测多种致病菌的方法.结果 该方法检测的菌液灵敏度分别是沙门菌168 CFU/ml,志贺菌136CFU/ml,金黄色葡萄球菌1240CFU/ml,特异性强,整个过程只需要2h.结论 该方法能快速、灵敏、特异检出沙门菌、志贺菌和金黄色葡萄球菌.
作者:陈萍;魏琼;史艳宇;任常菲
来源:卫生研究 2012 年 41卷 2期