目的 通过基因重组方式获得高纯度、高含量重组金黄色葡萄球菌肠毒素A(rSEA).方法 将金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因片段插入pET28a载体中,测序并正确鉴定后,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达目的蛋白.重组蛋白用Ni-NTA His蛋白亲和柱纯化.结果 SDS-PAGE结果表明成功表达了分子量约为30 kD的重组蛋白,经Western blot和小鼠生物学鉴定,表达产物为重组金黄色葡萄球菌肠毒素A,并且具有较好的免疫原性,为制备抗金黄色葡萄球菌肠毒素A单克隆抗体及建立相应的免疫学检测方法奠定了基础.结论 构建的rSEA表达载体稳定,可高效表达目的rSEA蛋白.
作者：王佳慧；李楠；沈青；韩春卉；张靖；江涛；李凤琴
来源：卫生研究 2013 年 42卷 6期
