目的:获得低毒性但仍保留其免疫活性、高纯度的重组D227A突变型金葡菌肠毒素A蛋白(rSEAD227A).方法:利用PCR技术克隆含D227A突变的SEA基因并原核表达,用盐酸胍溶解包涵体并进行梯度透析复性;使用StrepⅡ亲和层析来纯化蛋白;免疫印迹和LC-MS/MS进行鉴定.结果:成功克隆SEA的D227A突变体,获得了高纯度的rSEAD227A蛋白. LC-MS/MS分析证实,胰酶消化后的rSEAD227A肽段序列与数据库中SEA的序列匹配.结论:获得了高纯度rSEAD227A蛋白,为SEA的进一步基础研究和临床应用提供了实验基础.
作者：刘雪婷；曾丽萍；谢洋；张建国；邹泽红；陶爱林
来源：中国免疫学杂志 2018 年 34卷 6期
