目的:建立一种高效的福寿螺纤溶酶(ACFE)分离纯化技术,并研究其理化性质.方法:福寿螺经组织匀浆、缓冲液抽提与选择性热变性,再经大豆胰蛋白酶抑制剂耦联的Sepharose 4B亲和层析、DEAE-Sephacel离子交换层析与羟基磷灰石亲和层析.结果:分离纯化得到一种均一的ACFE成分,其分子量为32 kD,pI为3.6,最适pH在9.5~11.0之间,该酶热稳定性强,能抗4 mol/L脲处理;其具有水解合成底物S-2288和Chromozym P的活性,活性受Zn2+、Cu2+等抑制,受对氨基磺酸氟(PMSF)抑制,但不受对羟甲基苯磺酸(PHMB)影响.结论:首次从福寿螺体内分离纯化得到ACFE.
作者:毛孙忠;雷康福;严哲
来源:温州医学院学报 2005 年 35卷 6期