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目的:探讨 PTEN 抑制神经干细胞增殖的作用,以阐明是否可以通过抑制 PTEN 蛋白表达来促进神经干细胞增殖。方法取新生24 h 昆明小鼠海马组织,分离培养原代神经干细胞,并采用免疫荧光检测鉴定;将所培养的传代神经干细胞随机分组:正常组、缺血模型组、低氧组(低氧+缺血模型组)、Lip2000组(低氧+缺血模型组+Lip2000空转染组)、PTEN 转染组(低氧+缺血模型组+Ad5-PTEN 转染组)、PTEN 干扰组(低氧+缺血模型组+ Lip2000+PTENsiRNA 干扰组),检测0、6、24、36、48 h 不同时间点各组神经干细胞的增殖情况,同时检测 PTEN 转染后 PTEN蛋白在各组神经干细胞的表达情况,以及对 PI3K-Akt 信号通路上标志性蛋白表达的影响。结果免疫荧光检测Nestin 以鉴定神经干细胞球,在荧光显微镜下观察到绿色明亮且典型的细胞球,球内可见清晰结构。MTT 测定发现低氧组、Lip2000组培养36 h 时神经干细胞出现明显增殖,与模型组、PTEN 转染组及 PTEN 干扰组相比,差异有统计学意义(P <0.05),其中 PTEN 干扰组的细胞增殖又较模型组、PTEN 转染组明显,差异亦有统计学意义(P <0.05);与正常组细胞比较,模型组与 PTEN 转染组的 PTEN 表达升高(P <0.05),且均较正常组降低(P <0.05),其中低氧组、Lip2000组与 PTEN 干扰组降低的趋势相当(P >0.0

作者:崔晓萍;陈建梅;穆军山;叶建新;林敏;王魁花;林航

来源:西安交通大学学报(医学版) 2016 年 2期

知识库介绍

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作者:
崔晓萍;陈建梅;穆军山;叶建新;林敏;王魁花;林航
来源:
西安交通大学学报(医学版) 2016 年 2期
标签:
神经干细胞 PTEN PI3K/Akt 信号通路 低氧 bad 海马 neural stem cell PTEN PI3K/Akt signaling pathway hypoxia bad hippocampus
目的:探讨 PTEN 抑制神经干细胞增殖的作用,以阐明是否可以通过抑制 PTEN 蛋白表达来促进神经干细胞增殖。方法取新生24 h 昆明小鼠海马组织,分离培养原代神经干细胞,并采用免疫荧光检测鉴定;将所培养的传代神经干细胞随机分组:正常组、缺血模型组、低氧组(低氧+缺血模型组)、Lip2000组(低氧+缺血模型组+Lip2000空转染组)、PTEN 转染组(低氧+缺血模型组+Ad5-PTEN 转染组)、PTEN 干扰组(低氧+缺血模型组+ Lip2000+PTENsiRNA 干扰组),检测0、6、24、36、48 h 不同时间点各组神经干细胞的增殖情况,同时检测 PTEN 转染后 PTEN蛋白在各组神经干细胞的表达情况,以及对 PI3K-Akt 信号通路上标志性蛋白表达的影响。结果免疫荧光检测Nestin 以鉴定神经干细胞球,在荧光显微镜下观察到绿色明亮且典型的细胞球,球内可见清晰结构。MTT 测定发现低氧组、Lip2000组培养36 h 时神经干细胞出现明显增殖,与模型组、PTEN 转染组及 PTEN 干扰组相比,差异有统计学意义(P <0.05),其中 PTEN 干扰组的细胞增殖又较模型组、PTEN 转染组明显,差异亦有统计学意义(P <0.05);与正常组细胞比较,模型组与 PTEN 转染组的 PTEN 表达升高(P <0.05),且均较正常组降低(P <0.05),其中低氧组、Lip2000组与 PTEN 干扰组降低的趋势相当(P >0.0