目的构建人嗜酸性粒细胞来源的神经毒素(hEDN)与乙肝病毒核心蛋白(HBVc)的融合真核表达载体(该融合蛋白即为构建的靶向核糖核酸酶),抑制乙肝病毒在细胞内的复制.方法分别从HL-60细胞和2.2.15细胞中提取总RNA,用RT-PCR特异性扩增hEDN及HBVc编码基因,将hEDN 和HBVc克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-),hEDN克隆入原核表达载体pGEX4T-1,并以纯化的原核表达产物免疫Balb/c 小鼠,制备特异性抗体.用免疫荧光法检验pcDNA3.1(-)/HBVc-hEDN在转染2.2.15细胞内地表达.结果成功地构建了hEDN 和HBVc 的真核融合表达载体,并在2.2.15细胞中较高效地表达.结论 pcDNA3.1(-)/HBVc-hEDN的构建和在2.2.15细胞内的表达,为探索乙型肝炎的治疗开辟了新思路.
作者:李英辉;刘军;薛采芳
来源:细胞与分子免疫学杂志 2002 年 18卷 3期