目的构建编码人Ⅱ型胶原蛋白250~270多肽片段(HuC Ⅱ 250~270)的多聚基因,以获得高效表达、高度可溶和便于纯化的重组多肽基因.方法选用大肠杆菌(E.coli)偏爱密码子优化HuC Ⅱ 250~270的基因组成.通过化学合成和PCR法,获得HuC Ⅱ 250~270的基因,并利用Bam HI和BglⅡ同裂酶进行酶切位点串联获得6聚体.对影响重组HuC Ⅱ 250~270表达的各种因素进行系统研究,以获得优化表达的条件.对表达产物进行分离纯化.结果酶切分析和DNA测序证实,6聚目的基因的构建正确.融合表达的量明显高于非融合表达,在优化条件下,可达30
作者:王宏坤;朱平;王彦宏;赵旭东;陈常庆
来源:细胞与分子免疫学杂志 2002 年 18卷 4期