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目的:建立从小鼠腹水中纯化鼠抗人CD28单克隆抗体(mAb)2F5的两步串联层析法.方法:将含mAb 2F5的腹水经离心、过滤及缓冲溶液变换预处理后,先经固相化金属螯合亲和层析法(immobilized metal affinity chromatography,IMAC)纯化,去除大部分杂蛋白,再经凝胶过滤层析法(gel filtration,GF)精细纯化,并探讨了上样的流速和洗脱液的种类对mAb 2F5纯度的影响.纯化的mAb 2F5的生物学活性用3H-TdR掺入法进行分析.结果:以两步串联层析法纯化的鼠抗人CD28 mAb 2F5的纯度大于90

作者:马泓冰;孙中文;徐颖;李文香;陶然;陈洁;张学光

来源:细胞与分子免疫学杂志 2007 年 23卷 2期

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作者:
马泓冰;孙中文;徐颖;李文香;陶然;陈洁;张学光
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2007 年 23卷 2期
标签:
固相化金属螯合层析法 凝胶过滤层析法 纯化 单克隆抗体
目的:建立从小鼠腹水中纯化鼠抗人CD28单克隆抗体(mAb)2F5的两步串联层析法.方法:将含mAb 2F5的腹水经离心、过滤及缓冲溶液变换预处理后,先经固相化金属螯合亲和层析法(immobilized metal affinity chromatography,IMAC)纯化,去除大部分杂蛋白,再经凝胶过滤层析法(gel filtration,GF)精细纯化,并探讨了上样的流速和洗脱液的种类对mAb 2F5纯度的影响.纯化的mAb 2F5的生物学活性用3H-TdR掺入法进行分析.结果:以两步串联层析法纯化的鼠抗人CD28 mAb 2F5的纯度大于90