目的 研究脾酪氨酸激酶(Syk)在LPS诱导的Toll样受体4(TLR4)信号转导通路的作用.方法 用100 ng/mL脂多糖和不同浓度Syk抑制剂分别处理RAW264.7巨噬细胞后,采用Alarmarblue方法检测细胞增殖；采用Griess试剂检测细胞培养液中NO的含量；Western blot法检测诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)的蛋白表达；ELISA检测巨噬细胞中TNF-α和IL-6含量,RAW-BlueTM巨噬细胞检测核因子κB (NF-κB)和激活子蛋白-1(AP-1)的活化.结果 Syk抑制剂作用于RAW264.7巨噬细胞24h,(0.5～14.0) μmol/L的Syk抑制剂对细胞增殖无明显影响,但当剂量超过1.5 μmol/L时,能显著抑制LPS刺激的RAW264.7巨噬细胞NO的产生和iNOS的蛋白表达,抑制TNF-α和IL-6的产生(P＜0.01)以及NF-κB和AP-1的激活.结论 Syk抑制剂降低LP诱导的巨噬细胞分泌NO和iNOS的蛋白表达及TNF-α和IL-6的释放,通过下调Syk下游TLR4受体信号传导通路的蛋白,进而显著降低转录因子NF-κB和AP-1的激活有关.
作者：崔树娜；Ursula Bilitewski
来源：细胞与分子免疫学杂志 2013 年 29卷 10期
