目的 筛选及表达抗严重发热伴血小板减少综合征病毒 (SFTSV) 包膜糖蛋白 (Gn) 单链抗体 (scFv) .方法 利用人源化SFTSV的scFv文库与固相化包被的SFTSV-Gn蛋白特异性结合, 经过4轮"吸附-洗脱-扩增"筛选能特异性结合SFTSV-Gn蛋白的噬菌体scFv, 随机挑取最后一轮单菌落进行噬菌体-ELISA鉴定, 将经过测序鉴定正确的阳性克隆转入大肠杆菌BL21 (DE3) 感受态细胞中原核表达, 用Western blot法鉴定scFv的表达, ELISA鉴定纯化后scFv的结合活性.结果 筛选出3株不同序列的抗SFTSV-Gn蛋白的scFv, Western blot法结果显示scFv得到正确表达, ELISA结果显示纯化后的scFv具有结合活性.结论 成功筛选及表达了抗SFTSV-Gn蛋白的scFv.
作者:张文帅;郭喜玲;迟莹;焦永军
来源:细胞与分子免疫学杂志 2019 年 35卷 1期