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目的 探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白L/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL邝2GPI/aβ2GPI)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响以及ROS活性氧(ROS)在其中的作用.方法 分别用β2GPI、aβ2GPI、β2GPI/aβ2GPI复合物、oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、oxLDL/β2GPI/兔IgG(R-IgG)复合物、oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物刺激HUVEC,利用Western blot法检测凋亡相关蛋白BAX、Bcl2和裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)的蛋白水平;异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexin Ⅴ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡率、二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)标记结合流式细胞术检测细胞ROS水平;CCK-8法检测各处理组对HUVEC活力的影响;采用抗氧化剂罗布麻宁(apocynin)或二苯基碘氯化物(DPI)预处理后观察ROS水平的改变以及对oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物诱导的HUVEC凋亡的影响.结果 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物能显著降低HUVEC的活力,增加细胞BAX、c-caspase-3蛋白水平,降低Bcl2蛋白水平,促进HUVEC凋亡;oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物引起细胞ROS水平升高,抗氧化剂处理后,细胞内ROS水平降低,细胞凋亡减少.结论 oxLDLβ2GPI/aβ2GPI复合物可以通过提高ROS来诱导HUVEC凋亡.

作者:陈芋丹;周红;何超;王婷;张贵婷;张鹏;王韧;吴倩倩;姚雨叶

来源:细胞与分子免疫学杂志 2019 年 35卷 3期

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陈芋丹;周红;何超;王婷;张贵婷;张鹏;王韧;吴倩倩;姚雨叶
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2019 年 35卷 3期
标签:
氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/aβ2GPI)复合物 活性氧(ROS) 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 凋亡
目的 探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白L/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL邝2GPI/aβ2GPI)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响以及ROS活性氧(ROS)在其中的作用.方法 分别用β2GPI、aβ2GPI、β2GPI/aβ2GPI复合物、oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、oxLDL/β2GPI/兔IgG(R-IgG)复合物、oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物刺激HUVEC,利用Western blot法检测凋亡相关蛋白BAX、Bcl2和裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)的蛋白水平;异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexin Ⅴ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡率、二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)标记结合流式细胞术检测细胞ROS水平;CCK-8法检测各处理组对HUVEC活力的影响;采用抗氧化剂罗布麻宁(apocynin)或二苯基碘氯化物(DPI)预处理后观察ROS水平的改变以及对oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物诱导的HUVEC凋亡的影响.结果 oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物能显著降低HUVEC的活力,增加细胞BAX、c-caspase-3蛋白水平,降低Bcl2蛋白水平,促进HUVEC凋亡;oxLDL/β2GPI/aβ2GPI复合物引起细胞ROS水平升高,抗氧化剂处理后,细胞内ROS水平降低,细胞凋亡减少.结论 oxLDLβ2GPI/aβ2GPI复合物可以通过提高ROS来诱导HUVEC凋亡.