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目的 基于活性氧/核因子κB (ROS/NF-κB)信号通路探讨高糖诱导的人肾小管上皮细胞转分化机制.方法 HK-2正常人近端肾小管上皮细胞随机分为空白对照组、渗透压对照组、高糖组、吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)组.用相差显微镜观察细胞形态、噻唑蓝(MTr)法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞内ROS含量,ELISA检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western blot法检测细胞NF-κBp65、磷酸化的NF-κB抑制蛋白α(p-IκBα)和IκB激酶α(IKKα)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的蛋白水平;免疫细胞化学法检测细胞NF-κBp65、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达.结果 高糖组细胞变成长梭形或不规则形,边缘可呈现放射状,细胞间隙变大,折光度下降,排列不整齐.同时细胞活性随处理时间的延长不断下降,PDTC组细胞活性较高糖组高.与空白对照组相比,高糖组ROS及MDA含量增加、SOD活性下降,PDTC组ROS及MDA含量较高糖组减少、SOD活性较高糖组增强.与空白组比较,高糖组NF-κBp65、p-IκBα、IKKα、MCP-1、ICAM-1蛋白水平增加;与高糖组比较PDTC组以上蛋白水平降低.与空白组比较,高糖组NF-κBp65及α-SMA的阳性细胞所占比率升高、E-cadherin的阳性细胞所占比率降低;与高糖组比

作者:张磊;金华;王亿平;王东;李卓娅

来源:细胞与分子免疫学杂志 2019 年 35卷 4期

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作者:
张磊;金华;王亿平;王东;李卓娅
来源:
细胞与分子免疫学杂志 2019 年 35卷 4期
标签:
HK-2细胞 上皮间质转化 核因子κB(NF-κB) 活性氧(ROS)
目的 基于活性氧/核因子κB (ROS/NF-κB)信号通路探讨高糖诱导的人肾小管上皮细胞转分化机制.方法 HK-2正常人近端肾小管上皮细胞随机分为空白对照组、渗透压对照组、高糖组、吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)组.用相差显微镜观察细胞形态、噻唑蓝(MTr)法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞内ROS含量,ELISA检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western blot法检测细胞NF-κBp65、磷酸化的NF-κB抑制蛋白α(p-IκBα)和IκB激酶α(IKKα)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的蛋白水平;免疫细胞化学法检测细胞NF-κBp65、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达.结果 高糖组细胞变成长梭形或不规则形,边缘可呈现放射状,细胞间隙变大,折光度下降,排列不整齐.同时细胞活性随处理时间的延长不断下降,PDTC组细胞活性较高糖组高.与空白对照组相比,高糖组ROS及MDA含量增加、SOD活性下降,PDTC组ROS及MDA含量较高糖组减少、SOD活性较高糖组增强.与空白组比较,高糖组NF-κBp65、p-IκBα、IKKα、MCP-1、ICAM-1蛋白水平增加;与高糖组比较PDTC组以上蛋白水平降低.与空白组比较,高糖组NF-κBp65及α-SMA的阳性细胞所占比率升高、E-cadherin的阳性细胞所占比率降低;与高糖组比