目的 探讨沉默钙网蛋白(CALR)基因对人肝星状细胞(HSC-LX2)凋亡及细胞内Ca2+水平的影响.方法 设计靶向CALR的小干扰RNA(siRNA),脂质体法转染至HSC-LX2细胞,筛选出敲低CALR的HSC-LX2细胞.采用异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexin Ⅴ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,Fluo 3-AM钙离子荧光探针负载结合激光共聚焦显微镜观察细胞内Ca2+浓度变化,反转录PCR检测细胞CALR、B细胞淋巴瘤分子2(Bcl2)、Bcl2相关X蛋白(BAX)的mRNA水平,Western blot法检测CALR、BAX、Bcl2蛋白表达.结果 敲低HSC-LX2细胞CALR后,细胞凋亡率显著增加,Ca2+浓度也有明显升高,BAX的表达显著增加,Bcl2表达明显降低,且BAX/Bcl2比值显著升高.结论 敲低HSC-LX2细胞CALR的表达会增加细胞Ca2+水平,上调BAX/Bcl2的比值,促进细胞凋亡.
作者：戴琳玉；王路广；刘海英；肖永红
来源：细胞与分子免疫学杂志 2021 年 37卷 6期
