目的 探讨微小RNA497(miR-497)在胃癌转移中的作用及机制.方法 SGC-7901胃癌亲本细胞培养在超低黏附环境中,重新贴壁后建立SGC-7901细胞失巢凋亡抵抗模型,集落形成实验、流式细胞术、TranswellTM实验和划痕愈合实验检测其细胞生物学行为与亲本细胞的差异、荧光定量PCR检测miR-497表达、Western blot法检测无翅基因/β联蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路关键蛋白以及上皮间质转化(EMT)相关蛋白如波形蛋白(vimentin)和上皮钙黏蛋白(E-cadherin)等表达的变化;亲本细胞和凋亡抵抗SGC-7901细胞转染miR-497抑制物(miR-497 inhibitor)或miR-497模拟物(miR-497 mimic),CCK-8法检测其增殖活性、TranswellTM侵袭实验检测细胞侵袭能力、TranswellTM迁移实验和划痕愈合实验检测细胞迁移能力、Western blot法检测Wnt1、β-catenin、E-cadherin、vimentin蛋白表达的变化.通过在失巢凋亡抵抗SGC-7901细胞中转染miR-497 mimic,在裸鼠皮下接种,测量并记录肿瘤组织的体积及质量的变化,Western blot法检测Wnt1、β-catenin、E-cadherin、vimentin蛋白表达的变化.结果 与亲本细胞相比,SGC-7901胃癌失巢凋亡抵抗细胞增殖速度更快、集落形成更强,凋亡率更低,侵袭和迁移能力更强,miR-497表达明显下降.下调miR-497后细胞增殖能力显著
作者:禹莉;许颖;杨靖瑞;高榴;李海翔;王姿涵;张兆君;凌云志
来源:细胞与分子免疫学杂志 2023 年 39卷 7期