目的 探讨A549细胞株NS基因的表达干扰后,A549细胞株的mRNA表达水平及细胞增殖变化.方法 构建NS shRNA真核表达载体,转染A549细胞,G418筛选稳定表达细胞克隆,RT-PCR检测NS基因沉默,MTT检测细胞增殖情况.结果 构建的NS shRNA真核表达载体经菌落PCR和测序证实重组表达载体中插入序列与设计一致.RT-PCR检测显示构建的shRNA表达载体转染A549细胞后可显著降低NS mRNA的表达;MTT结果显示干扰后细胞增殖速率明显减低.结论 成功构建了一组针对NS基因的shRNA真核表达载体,转染A549钿胞后NS基因表达被特异性沉默,且细胞增殖受到明显抑制,通过RNAi技术实现NS基因沉默可能是一种较有前景的肿瘤治疗方法.
作者:黄平;高秀峰;高鸿霞;郑素平
来源:西部医学 2009 年 21卷 7期