目的 构建Survivin-siRNA真核表达载体,并探讨其对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响.方法 化学合成4条能转录出siRNA的模板DNA,各75个碱基,退火形成2条双链DNA,双酶切后插人pSUPER.basic载体.将阳性重组质粒转染SGC-7901细胞,进行细胞计数,并用MTT法检测细胞的增殖活性;半定量RT-PCR检测细胞Survivin基因mRNA的转录水平;流式细胞术检测细胞周期的变化.结果 PCR和酶切鉴定表明Survivin-siRNA真核表达载体构建正确,其能下调SGC-7901细胞Survivin基因mRNA的转录水平,抑制SGC-7901细胞生长和增殖,并促进细胞凋亡,使Go/G1和亚G1期细胞增多,S期细胞减少.结论 已成功构建了Survivin-siRNA真核表达载体,其能下调SGC-7901细胞中Survivin基因mRNA的转录水平,使细胞增殖减弱,凋亡增加,为RNA干扰技术应用于胃癌的基因治疗提供了一定的实验依据.
作者：陈卫；王玉平；庞春艳；王毅君
来源：中国生物制品学杂志 2009 年 22卷 10期
