目的 以信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)为靶基因,设计并构建短发夹状小干扰RNA表达载体,探讨STAT3小干扰RNA表达载体对胃癌细胞株SGC7901增殖和凋亡的影响.方法 以PAVU6+27质粒为载体,构建STAT3的小干扰RNA表达载体,并将其转染胃癌SGC7901细胞,G418筛选后经反转录聚合酶链反应和Western blot法检测STAT3基因和蛋白表达的改变,MTT法和3H-TdR掺入率检测细胞增殖和DNA合成情况,原位凋亡检测细胞凋亡率,流式细胞术检测抗细胞凋亡因子Bcl-2的表达.结果 酶切鉴定和测序分析表明靶向STAT3的RNA干扰重组体构建成功;重组体转染SGC7901后,STAT3的mRNA和蛋白水平较空载体转染组显著下降;MTT比色A值和3H-TdR掺入率均明显低于对照组(P＜0.05),凋亡率升高(P＜0.01),Bcl-2表达下降.结论 STAT3小干扰RNA表达载体可能是抑制人胃癌细胞增殖和促进凋亡的有效手段.
作者：张伟；吴强；谭德明
来源：第三军医大学学报 2007 年 29卷 7期
