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目的 探讨信号转导与激活因子3(signal transduction and activators of transcription 3,STAT3)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的作用.方法 根据siRNA(small interference RNA,siRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U 6-neo质粒特点,针对STAT3基因设计并合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer 2.1-U 6-neo质粒,应用脂质体将重组质粒转染人卵巢癌SKOV3细胞.RT-PCR和Western blot检测SKOV3细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达水平;MTT法和流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡.结果 成功构建了STAT3基因shRNA真核表达载体,转染卵巢癌SKOV3细胞.细胞STAT3蛋白及mRNA表达下降,同时细胞增殖能力下降,凋亡率增加.结论 构建的STAT3基因shRNA真核表达载体能够抑制卵巢癌细胞的增殖功能,诱导细胞凋亡.

作者:聂风华;李瑞玲

来源:职业与健康 2009 年 25卷 16期

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作者:
聂风华;李瑞玲
来源:
职业与健康 2009 年 25卷 16期
标签:
卵巢癌 STAT3 RNA干扰 增殖 凋亡 Ovarian cancer STAT3 RNA interference Proliferation Apoptosis
目的 探讨信号转导与激活因子3(signal transduction and activators of transcription 3,STAT3)短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的作用.方法 根据siRNA(small interference RNA,siRNA)设计原则,结合pSilencer2.1-U 6-neo质粒特点,针对STAT3基因设计并合成两条寡聚DNA片段,退火后克隆入pSilencer 2.1-U 6-neo质粒,应用脂质体将重组质粒转染人卵巢癌SKOV3细胞.RT-PCR和Western blot检测SKOV3细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达水平;MTT法和流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡.结果 成功构建了STAT3基因shRNA真核表达载体,转染卵巢癌SKOV3细胞.细胞STAT3蛋白及mRNA表达下降,同时细胞增殖能力下降,凋亡率增加.结论 构建的STAT3基因shRNA真核表达载体能够抑制卵巢癌细胞的增殖功能,诱导细胞凋亡.