目的:构建以STAT3为靶基因的短发夹状小干扰RNA表达载体,并探讨STAT3小干扰RNA表达载体对人结肠癌HCT116细胞增殖和凋亡的影响.方法:以pGPU6/GFP/STAT3质粒为载体,构建STAT3的小干扰RNA表达载体,使用脂质体法转染人结肠癌HCT116细胞系,用MTT法检测空白对照组、小干扰RNA组、阴性对照组与脂质体对照组的增殖活性,48 h后流式细胞仪分析4组细胞周期分布与凋亡的变化,并且通过RTPCR和Westem blot检测结肠癌HCT116细胞STAT3基因mRNA和蛋白表达水平.结果:酶切鉴定和测序分析表明靶向STAT3的RNA干扰重组体构建成功;重组体转染HCT116后,STAT3的mRNA和蛋白水平较空载体转染组显著下降;小干扰RNA组与3对照组相比细胞增殖活性明显受到抑制(P＜0.01);细胞生长明显减缓,G0/G1期细胞比例增加(P＜0.01).结论:沉默STAT3基因可有效控制结肠癌细胞的增殖,使癌细胞阻滞于G0/G1期并诱导其凋亡,可望成为结肠癌治疗的新方法.
作者：崔春晖；王朝阳；黄宗海
来源：广州医学院学报 2009 年 37卷 6期
