目的 探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)对病毒感染的心肌细胞炎症及凋亡的影响.方法 分离培养SD乳鼠心肌细胞,采用基因沉默的方法敲减NLRP3基因的表达,然后随机分为4组,分别包括正常对照组、Scrambled-siRNA组、CVB3+Scrambled-siRNA 组、CVB3+NLRP3-siRNA组.ELISA检测心肌损伤标志物CK-MB、cTnI及IL-1β、IL-18等炎症因子水平,RT-qPCR、Western blot检测NLRP3炎性小体通路的激活情况以及细胞内外源凋亡途径caspase-8、Bcl-2、Bax、caspase-9、caspase-3等的水平.结果 与正常对照组相比,CVB3+Scrambled-siRNA组中NLRP3通路被激活,其下游的caspase-1被活化,IL-1β、IL-18表达增加(P＜0.05),caspase-8、caspase-3、caspase-9活化增强,Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达增高,Bax/Bcl-2比值增大(P＜0.05),心肌细胞凋亡及CK-MB、cTnI均增加(P＜0.05).敲减NLRP3基因表达后,与CVB3+Scrambled-siRNA组比较,caspase-1活性被抑制,IL-1β、IL-18表达降低(P＜0.05),caspase-3、caspase-9活性降低,Bcl-2下降程度减弱,Bax/Bcl-2比值降低(P＜0.05),但对caspase-8、Bax的蛋白表达无明显影响(P＞0.05).结论 NLRP3信号通路在病毒感染早期导致心肌细胞损伤过程中起重要作用,抑制NLRP3过度激活会减轻心肌细胞炎症损

作者：李卫东；颜源均；赵世桥；冯尧；蒲志强；冯飞

来源：西部医学 2021 年 33卷 7期