以抗旱性较强的棉花品种‘KK1543’为材料,采用RT-PCR技术克隆了1个棉花HSP70基因,命名为GhHSP70.研究结果表明:GhHSP70基因开放阅读框长1 997 bp,编码648个氨基酸,GhHSP70蛋白相对分子量为70.94 kD,等电点为4.83.氨基酸序列比对和系统进化树分析发现,GhHSP70与欧洲大叶杨HSP70的亲缘关系最近,氨基酸序列一致性达到96.4％.为进一步分析基因的功能,构建原核表达载体pGEX-4T-1-GhHSP70,并在大肠杆菌中异源表达.SDS-PAGE分析表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致,重组蛋白在37℃,o.2 mmol/LIPTG诱导2h时表达量最大.研究为进一步研究棉花HSP70基因功能奠定基础.
作者：刘娜；曲延英；陈全家；倪志勇
来源：西北植物学报 2015 年 35卷 4期
