背景:聚合酶链式反应-直接测序分型技术被誉为HLA分型的金标准.在临床移植配型和骨髓库供者的大规模HLA分型中逐渐被广泛采用,但该方法的最大缺点是存在较高比例的模棱两可分型结果,故亟待寻找并建立适合中华骨髓库大规模供者HLA-测序模棱两可分型结果的解决方案.目的:调查中国南方汉族人群HLA-A,B,DRB1基因测序分犁中模棱两可结果的分布状况,评估其可能的解决方案.设计、时间及地点:观察测量实验,2007-08/2008-08在深圳市血液中心输血医学研究所免疫遗传重点实验室完成.对象:选择深圳骨髓库的汉族骨髓供者416名,供者民族和籍贯按照自述原则确定.方法:采用聚合酶链反应-直接测序分型方法对416名汉族供者的HLA-A,B,DRB1基因进行测序分型,分析3个基因座模棱两可分型结果的分布情况,并分别采用高分辨聚合酶链反应-序列特异性引物法和杂合性模棱两可引物分离法进行解决:采用直接计数法统计基因频率,计算真实等位基因的相对概率.主要观察指标:416名供者HLA-A,B,DRB1基因直接测序分型结果的分布.HLA-A,B,DRB1基因测序模棱两可分型结果的分类及分布.序列特异性引物法及杂合性模棱两可引物分离法对模棱两可分型结果的解决能力.结果:80.29
作者:邹红岩;程良红;金士正;李桢;王巍;蒋妍
来源:中国组织工程研究与临床康复 2008 年 12卷 53期