背景：胎肝干细胞具有分化成肝细胞、胆管细胞的潜能，参与肝脏的修复与重建，是肝细胞的重要来源，但是人体的胎肝干细胞含量极少，如何获取一定数量和较高纯度的胎肝干细胞是目前研究的热点。目的：构建能有效抑制大鼠胎肝干细胞Cx43基因表达的siRNA载体，探讨抑制 Cx43表达对体外培养的鼠胎肝干细胞增殖及细胞周期的影响。方法：体外培养鼠胎肝干细胞，设计及合成靶向 Cx43的 siRNA 序列(Cx43-siRNA)以及阴性对照序列(NC-siRNA)，采用电转法转染大鼠胎肝干细胞，即为实验组和对照组，未转染的胎肝干细胞为空白组。应用real-time PCR和Western blot法检测转染前后鼠胎肝干细胞Cx43基因和蛋白的表达；细胞生长曲线、CCK-8法观察细胞生长增殖情况；流式细胞术测定细胞周期分布的变化。结果与结论：转染Cx43-siRNA后，实验组与对照组、空白组相比Cx43基因和蛋白水平表达均明显降低，细胞的生长速度明显增快，G 0/G 1期细胞减少，S期细胞数增多，差异有显著性意义(P <0.05)，结果表明通过电转法转染靶向Cx43的siRNA能促进体外培养的鼠胎肝干细胞增殖，对其培养有优化作用。
作者：张增光；秦鸣放
来源：中国组织工程研究 2015 年 14期
