背景：大鼠心肌细胞原代培养技术日渐成熟，但小鼠心肌细胞在同样实验条件下不易获得，而小鼠基因组与人类基因组有更多相似之处，具有更高的研究价值。<br> 目的：改进小鼠乳鼠原代心肌细胞的培养方法，得到纯度高、活力强、保持心肌细胞原有结构和功能的心肌细胞。<br> 方法：将小鼠心肌组织利用酶消方法分离为单个的心肌细胞，实验步骤中将经典的胰酶、胶原蛋白酶混合酶消法分解开，先用胰酶消化心肌组织，使心肌组织变得松散，再用胶原蛋白酶，作用于细胞间质的胶原纤维，使心肌组织分离为单个的心肌细胞。调整胰酶和Ⅱ型胶原蛋白酶的浓度和作用时间，严格控制试剂pH值和各步骤的温度。<br> 结果与结论：心肌细胞在接种24 h后开始贴壁，48 h后可观察到部分心肌细胞出现自主搏动，72 h后彼此形成交联，96 h后可观察到心肌细胞形成细胞簇，并出现一致性搏动。心肌细胞的存活率和纯度均达95
作者：孟琳琳；黄莺；马依彤；刘芬；陈邦党；陈小翠；盖敏涛
来源：中国组织工程研究 2015 年 37期
