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背景:成熟心肌细胞分离过程复杂,获得数量稳定、高质量的心肌细胞迄今仍无统一、高效、活性好、简便的方法可循.目的:通过改良Langendorff细胞灌流分离装置,探讨一种更高效的成熟心肌细胞分离方法.方法:采用细胞灌流分离装置,用Ⅱ型胶原酶经主动脉逆行灌流法分离成年SD大鼠心肌细胞.对照组采用传统Langendorff细胞灌流分离装置;实验组采用改良Langendorff细胞灌流分离装置.消化结束即刻在显微镜下观察细胞形态、杆状细胞比率并计算活细胞产量;通过锥虫蓝染色评价心肌细胞活性.结果与结论:实验组活细胞产量为(3.7±0.5)×10 7,显著高于对照组(2.1±0.4)×1 07,差异有显著性意义(P<0.05).实验组锥虫蓝染色阴性的杆状细胞比率(85.6±5.5)%,显著高于对照组(71.8±5.7)%,差异有显著性意义(P<0.05).提示采用改良Langendorff离体心脏灌流系统可获得高产量、高活性的心肌细胞,提高了成熟心肌细胞的分离效率,为成熟心肌细胞培养及研究奠定了基础.

作者:张琳;纵静;张庆涛

来源:中国组织工程研究 2015 年 19卷 51期

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作者:
张琳;纵静;张庆涛
来源:
中国组织工程研究 2015 年 19卷 51期
标签:
组织构建 组织工程 心肌细胞 大鼠 分离装置 细胞活性 国家自然科学基金
背景:成熟心肌细胞分离过程复杂,获得数量稳定、高质量的心肌细胞迄今仍无统一、高效、活性好、简便的方法可循.目的:通过改良Langendorff细胞灌流分离装置,探讨一种更高效的成熟心肌细胞分离方法.方法:采用细胞灌流分离装置,用Ⅱ型胶原酶经主动脉逆行灌流法分离成年SD大鼠心肌细胞.对照组采用传统Langendorff细胞灌流分离装置;实验组采用改良Langendorff细胞灌流分离装置.消化结束即刻在显微镜下观察细胞形态、杆状细胞比率并计算活细胞产量;通过锥虫蓝染色评价心肌细胞活性.结果与结论:实验组活细胞产量为(3.7±0.5)×10 7,显著高于对照组(2.1±0.4)×1 07,差异有显著性意义(P<0.05).实验组锥虫蓝染色阴性的杆状细胞比率(85.6±5.5)%,显著高于对照组(71.8±5.7)%,差异有显著性意义(P<0.05).提示采用改良Langendorff离体心脏灌流系统可获得高产量、高活性的心肌细胞,提高了成熟心肌细胞的分离效率,为成熟心肌细胞培养及研究奠定了基础.