背景:Wnt/β-catenin信号通路在骨关节炎的炎症反应病理过程中扮演着重要角色,而独活寄生汤拆方有效抑制软骨细胞的炎症反应有待进一步深入研究.目的:探讨独活寄生汤拆方是否可以通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制由脂多糖诱导的软骨细胞炎症反应.方法:①取SD雄性大鼠,采用机械Ⅱ型胶原酶消化法获取膝关节软骨细胞,倒置相差显微镜观察软骨细胞的形态结构,Ⅱ型胶原免疫组化鉴定软骨细胞.②用不同质量浓度的独活寄生汤拆方(300,400,500 mg/L)干预由脂多糖(10μg/L)诱导的软骨细胞炎症模型,干预8 h后,采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定各组软骨细胞培养液中白细胞介素1β、肿瘤坏子因子α水平,确定独活寄生汤拆方干预浓度.③将第2代软骨细胞分为4组:空白组含正常培养液;模型组培养液中含10μg/L脂多糖;独活寄生汤拆方组培养液中含10μg/L脂多糖和400 mg/L独活寄生汤拆方;抑制剂组培养液中含10μg/L脂多糖和10 mg/L Dickkopf-1.干预8 h后,采用Western blot法检测 β-catenin、Wnt-4、Frizzled-2、GSK-3β、CKI-ε 的蛋白表达量.结果与结论:①软骨细胞鉴定:获取的软骨细胞Ⅱ型胶原免疫组化染色胞浆呈棕黄色,具备软骨细胞典型特征;②ELISA结果显示:模型组培养液中白细胞介素1β 和肿瘤坏子因子 α水平均高于空白
作者：李慧；马玉环；许丽梅；王圣杰；许云腾；何晓娟；贾良良；曾建伟；王丽丽；李西海；叶蕻芝
来源：中国组织工程研究 2020 年 24卷 35期
