目的 利用抑制消减杂交技术(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)构建人大肠癌差异表达cDNA文库,分离并克隆出大肠癌发病的相关新基因.方法 运用抑制消减杂交技术分离大肠癌组织及癌旁正常黏膜差异表达基因的cDNA片断,将其与T载体连接构建文库,从库中随机挑取200个白色菌落,使用PCR方法鉴定阳性克隆并对其中50个克隆进行测序,将测序结果登录GenBank进行同源性对比分析,并对部分有意义的差异表达片断进行Virtual Northern Blot分析.结果 成功构建人源性大肠癌消减cDNA文库,通过筛选获得20个差异表达的基因,其中有2个片断未检测到同源性序列,根据杂交结果考虑可能是在大肠肿瘤中差异表达的新基因.结论 运用SSH技术成功构建了人大肠癌的差异表达的cDNA消减杂交文库,并筛选出 2个在大肠肿瘤中差异表达的新基因.
作者：叶方鹏；李荣洲；肖冰；张万岱
来源：现代消化及介入诊疗 2006 年 11卷 3期
