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目的 建立基于实时荧光环介导等温扩增的人乳头瘤病58型基因检测体系,用于其快速检测和早期诊断.方法 运用LAMP在线引物设计软件Primer Explorer V5,针对人乳头瘤病毒58型的L1区域保守基因设计引物,在反应前加入荧光核酸染料SYBR Green Ⅰ,并对该反应体系中的dNTPs、Mg2+和内引物(FIP、BIP)浓度进行优化,优化结果通过"S"型扩增曲线判断,并对优化后的实时荧光环介导等温扩增体系进行特异性、灵敏度检测及临床标本检测.结果 针对人乳头瘤病毒58型所建立的实时荧光环介导等温扩增检测体系具有良好的特异性及灵敏度,且与临床实验室检测结果(qPCR方法)的符合率达100%,该检测方法的灵敏度可达10拷贝/μL.结论 本研究建立了人乳头瘤病毒58型的实时荧光环介导等温扩增检测体系,它是一种耗时少、操作简便、特异性强、灵敏度高的方法,适用于HPV临床样本的快速检测.

作者:黄月明;周骏;牟颖;毕瑩;张智琪;吴青青

来源:现代预防医学 2020 年 47卷 23期

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作者:
黄月明;周骏;牟颖;毕瑩;张智琪;吴青青
来源:
现代预防医学 2020 年 47卷 23期
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实时荧光环介导等温扩增技术 人乳头瘤病毒58型 快速检测 早期诊断
目的 建立基于实时荧光环介导等温扩增的人乳头瘤病58型基因检测体系,用于其快速检测和早期诊断.方法 运用LAMP在线引物设计软件Primer Explorer V5,针对人乳头瘤病毒58型的L1区域保守基因设计引物,在反应前加入荧光核酸染料SYBR Green Ⅰ,并对该反应体系中的dNTPs、Mg2+和内引物(FIP、BIP)浓度进行优化,优化结果通过"S"型扩增曲线判断,并对优化后的实时荧光环介导等温扩增体系进行特异性、灵敏度检测及临床标本检测.结果 针对人乳头瘤病毒58型所建立的实时荧光环介导等温扩增检测体系具有良好的特异性及灵敏度,且与临床实验室检测结果(qPCR方法)的符合率达100%,该检测方法的灵敏度可达10拷贝/μL.结论 本研究建立了人乳头瘤病毒58型的实时荧光环介导等温扩增检测体系,它是一种耗时少、操作简便、特异性强、灵敏度高的方法,适用于HPV临床样本的快速检测.