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目的检测颈癌组织中人乳头瘤病毒58型(HPV58)并克隆表达其E7基因.方法采用 GP5+/GP6+引物系统扩增58例宫颈癌组织,将荧光偏振(FP)检测技术与模板指导的末端延伸反应(TDI-FP)结合,检测HPV58,确定HPV58感染阳性宫颈癌组织.用特异引物从HPV58阳性标本中扩增HPV58 早期表达蛋白E7基因,将其连入pGEM-T Easy载体,获得克隆重组体HPV58E7-pGEM-T,并测序验证.将E7基因与pRSET-A融合表达载体连接,获得E7表达重组体pRSET-58E7,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG诱导表达.结果 58例宫颈癌标本中,HPV58阳性10例,占52例HPV阳性标本的19.2

作者:高艳娥;张菊;陈中灿;宋天保;赵艳;张格林;阎小君

来源:中华肿瘤杂志 2004 年 26卷 9期

知识库介绍

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作者:
高艳娥;张菊;陈中灿;宋天保;赵艳;张格林;阎小君
来源:
中华肿瘤杂志 2004 年 26卷 9期
标签:
人乳头瘤病毒58型 E7基因 基因克隆 荧光偏振 宫颈肿瘤
目的检测颈癌组织中人乳头瘤病毒58型(HPV58)并克隆表达其E7基因.方法采用 GP5+/GP6+引物系统扩增58例宫颈癌组织,将荧光偏振(FP)检测技术与模板指导的末端延伸反应(TDI-FP)结合,检测HPV58,确定HPV58感染阳性宫颈癌组织.用特异引物从HPV58阳性标本中扩增HPV58 早期表达蛋白E7基因,将其连入pGEM-T Easy载体,获得克隆重组体HPV58E7-pGEM-T,并测序验证.将E7基因与pRSET-A融合表达载体连接,获得E7表达重组体pRSET-58E7,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG诱导表达.结果 58例宫颈癌标本中,HPV58阳性10例,占52例HPV阳性标本的19.2