目的 研究外源性神经生长因子(NGF)对QBC939细胞67-kDa层黏连蛋白受体(67LR)表达的影响,探讨胆管癌神经浸润的机制.方法 (1)细胞免疫荧光染色法检测QBC939细胞表面NGF高亲和力酪氨酸激酶受体A(TrkA)表达情况.(2)用不同浓度的重组人神经生长因子(β-NGF)对QBC939细胞进行处理,采用Real-Time PCR和Western blot检测QBC393细胞67LR mRNA和蛋白表达情况.实验分为对照组、β-NGF(1、10、100、200μg/L)组.(3)根据上述实验结果选定最佳β-NGF浓度,再加入不同浓度的TrkA阻断剂K252a,再次检测QBC939细胞67LR mRNA和蛋白表达情况.实验分为对照组、100μg/Lβ-NGF组、K252a(100、200、300 nmol/L)阻断组.数据采用单因素方差分析,两两比较采用LSD法.结果 (1)QBC939细胞膜上TrkA表达明显.(2)对照组和β-NGF(1、10、100、200 μg/L)组QBC939细胞67LRmRNA和蛋白表达水平分别为0.35±0.06、0.38±0.14、0.62±0.14、0.90±0.08、0.70±0.10和0.32±0.05、0.50±0.09、0.69±0.13、0.93±0.07、0.76±0.07,两者比较,差异有统计学意义(F=22.4,14.6,P＜0.05),其中100ng/ml β-NGF作用最明显(t=19.0,21.0,P＜0.05).(3)对照组、100 μg/L β-NGF组、K252a(100、200、300 nmol/L)阻断组QBC939细胞67LR mRNA和蛋白表达水平分别

作者：高杨；刘子沛；王曙光

来源：中华消化外科杂志 2011 年 10卷 2期