目的 探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)在结肠癌耐药中的作用及其可能机制.方法 回顾性分析2012年12月至2013年12月河南省肿瘤医院收治的25例5-氟尿嘧啶(5-FU)化疗耐药结肠癌患者和30例化疗敏感患者的临床资料.收集患者手术切除的结肠癌标本进行研究.(1)采用免疫组织化学染色检测化疗耐药和化疗敏感结肠癌患者的结肠癌组织中SIR1T蛋白表达.RT-PCR检测结肠癌细胞HCT116(以下简称HCT116细胞)和耐药结肠癌细胞HCT116/5-FU(以下简称HCT1 16/5-FU细胞)中SIRT1 mRNA.Western blot检测2种细胞中SIRT1蛋白表达.(2)细胞分组:①将HCT116/5-FU细胞进行siRNA干扰:空白对照组(细胞不做任何处理)、空载体组(细胞转染对照siRNA)和SIRT1沉默组(细胞转染SIRT1 siRNA).②将HCT116/5-FU细胞进行JNK蛋白抑制剂处理:SP600125组(浓度为30μmol/L的JNK蛋白抑制剂SP60012处理12 h),DMSO组(0.1％ DMSO处理12h)以及对照组(加入等量细胞培养液).③将HCT116/5-FU细胞中SIRT147位点丝氨酸突变成丙氨酸或天冬氨酸,获得突变体分别为S47A组和S47D组,以未转染的野生型细胞作为S47野生型组,并以转染空载体apCMV-3Tag-3细胞为阴性对照,均采用8 μmol/L的5-FU干预12 h.(3)分别采用0、1、10、50、100 nmol/L SIRT1激动剂白藜芦醇和0、1、2、3、4、

作者：付强；张永磊；成静；陈小兵；谢建国；罗素霞

来源：中华消化外科杂志 2015 年 14卷 3期