目的 通过增加外源性一氧化氮或减少内源性一氧化氮,观察一氧化氮对大鼠肠神经干细胞(ENSCs)增殖与分化的影响.方法 从孕15d胚鼠肠道提取肠神经干细胞,传代后肠神经干细胞分为DETA/NO 50 μ.mol/L组、L-NAME 100μmol/L组、DETA/NO50 μmol/L+L-NAME100 μmol/L组及空白对照组继续培养.培养48 h后,硝酸盐还原酶法检测各组培养液中一氧化氮浓度；形态学观察各组神经球大小；流式细胞仪检测各组肠神经干细胞Nestin、BrdU标记的增殖细胞、子代细胞神经元Tuj-1染色阳性细胞百分比及各组细胞的凋亡率.结果 与对照组(30.27±18.52)μmol/L相比,传代培养48 h后DETA/NO 50 μmol/L组一氧化氮浓度明显增加(51.94±12.43)μmol/L(P＜0.05)、L-NAME 100 μmol/L组明显减少(16.24±12.25)μmol/L (P＜0.05),DETA/NO 50 μmol/L+ L-NAME100mol/L组无明显差异(38.73±7.95)μmol/L(P＞0.05).形态学发现DETA/NO 50 μmol/L组神经球直径较小,L-NAME 100 μmol/L组神经球直径较大.流式检测发现DETA/NO 50 μmol/L组肠神经干细胞Nestin百分比(16.57±1.45)％明显降低(P＜0.05),BrdU标记的增殖细胞百分比(5.33±0.55)％明显降低(P＜0.05),神经元Tuj-1百分比(25.59±2.78)％明显增加(P＜0.05),而L-NAME 100μmol/L组则效应相

作者：刘淼清；林正秀；张田丰；王永飚；朱利斌；李仲荣

来源：中华小儿外科杂志 2013 年 34卷 4期